多色熒光技術(shù)mFISH 小常識
2023年02月13日 14:16:27
來源:自然基因科技有限公司 >> 進入該公司展臺
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mFISH顧名思義是多色FISH multi-coclour FISH或multiplex FISH, M-FISH 是在單色FISH基礎(chǔ)上發(fā)展起來的多色FISH技術(shù)。該技術(shù)采用兩種以上熒光標(biāo)記DNA探針與靶細胞中期染色體或間期細胞核雜交后(可選用美國自然基因有限公司提供的Thermobrite-NatureGene雜交儀),用IMSTAR**熒光檢測系統(tǒng)進行雜交信號的檢測與放大,通過兩種或多種不同濾光片組合或特制的一種濾光片觀察,雜交信號呈現(xiàn)出不同的顏色。顏色取決于標(biāo)記物連接的熒光物質(zhì)和復(fù)染染料的不同。例如,連接物有AMCA(藍色)FITC或dibopy(綠色)rhodamine 或Texas red(紅色)復(fù)染的熒光染料有PI(紅色)DAPI(藍色)quinacrine(綠色)等。Dauwerse等采取結(jié)構(gòu)標(biāo)記(combination labelling)或比率標(biāo)記(ratio lablling)的策略,以biotin digoxigeinh和FITC標(biāo)記探針,不同比例混合后進行雜交,同時觀察12種不同顏色的雜交結(jié)果。多色FISH技術(shù)可同時觀察兩種以上DNA探針的雜交信號,是研究幾種不同探針之間關(guān)系的理想手段,如檢測靶序列擴增水平,染色體微小缺失和染色體易位攜帶者。多色FISH還適用于診斷不同染色體區(qū)域的結(jié)構(gòu)異?;蛲瑫r存在的幾種染色體數(shù)量異常。
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