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尼康顯微鏡紫外激發(fā)塊藍(lán)色熒光蛋白(帶通)

2023年02月25日 12:07:56      來源:奧林巴斯顯微鏡 >> 進(jìn)入該公司展臺      閱讀量:12

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尼康顯微鏡紫外激發(fā)塊藍(lán)色熒光蛋白(帶通)

紫外線和用于高性能尼康藍(lán)色熒光蛋白可見光透射光譜圖(BFP)濾波器的組合在圖1,本濾波器組由使用帶通發(fā)射濾波器,其不同于紫羅蘭組中的另外兩個50納米以下所示通帶(435-485納米)限制檢測到的那些發(fā)射在藍(lán)光光譜區(qū)域的熒光染料。 此外,窄22納米的激發(fā)帶通(延伸至僅401納米)*大程度地減少自體熒光,并且被耦合以較低的二色鏡截止波長(420納米)相比被用在其它紫色過濾器集。 雖然主要設(shè)計用于熒光蛋白的成像,此帶通發(fā)射組合是用于獲得具有多個標(biāo)簽標(biāo)本圖像時熒光團(tuán)中的一個是有效地激發(fā)在紫色光譜區(qū)域是有用的。

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紫激發(fā)濾光片座BFP規(guī)格:

  • 激發(fā)波長篩選:379-401納米(帶通,390 CWL)

  • 雙色鏡截止波長:420納米(長通,LP)

  • 屏障過濾波長:435-485納米(帶通,460 CWL)

BFP濾波器塊被設(shè)計為*佳性能與藍(lán)色熒光蛋白,并通過利用帶通發(fā)射濾波器,紅色和綠色熒光的在乘法 - 標(biāo)記的試樣在黑色背景上排除的檢測,產(chǎn)生的圖像具有豐富的和深藍(lán)色的顏色。 窄帶寬激發(fā)濾光片旨在減少或消除內(nèi)源性腺嘌呤二核苷酸(NADH)的激發(fā)在紫外線和紫色波長的光。 學(xué)習(xí)下面的熒光團(tuán)時,BFP過濾器組合推薦:藍(lán)色熒光蛋白,增強藍(lán)色熒光蛋白,*發(fā)光藍(lán)色熒光蛋白,瀑布藍(lán),兒茶酚胺,熒光胺,羥基,Leucophor SF,太平洋藍(lán),以及TNS。 在圖2中呈現(xiàn)的圖像表明具有多種針對不同細(xì)胞內(nèi)位置紫羅蘭吸收熒光探針的這種過濾器組合的性能。

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示于圖2(a)和2(e)是從印 度麂的培養(yǎng)鹿皮成纖維細(xì)胞進(jìn)行了免疫熒光標(biāo)記與任一主抗牛的α-微管蛋白的發(fā)光強度(圖2(a))或抗OXPHOS復(fù)合V抑制劑蛋白(圖2(e))的隨后偶聯(lián)于太平洋藍(lán)山羊抗-小鼠Fab片段的小鼠單克隆抗體。 *大吸收太平洋藍(lán)的是410納米,并且*大發(fā)射發(fā)生在455納米。 注意細(xì)胞內(nèi)微管的突出染色(圖2(a))和線粒體(圖2(e))的網(wǎng)絡(luò)上延伸遍及在這些標(biāo)本的細(xì)胞質(zhì)中。(奧林巴斯顯微鏡)

圖2(b)表示由薄小鼠腎臟的部分用DAPI染色,將Alexa Fluor 488麥胚凝集素,綠色熒光的凝集素是特定于腎小球和曲小管的熒光發(fā)射強度。 *大吸收的DAPI的是358納米,并且發(fā)射*大值是461納米。 另外,檢體被同時染色的Alexa Fluor 568鬼筆環(huán)肽(絲狀肌動蛋白)。注意沒有光譜滲出通過從紅色和綠色的熒光團(tuán)。 圖2(D)呈現(xiàn)具有用DAPI染色的細(xì)胞核牛肺動脈培養(yǎng)細(xì)胞。 盡管DAPI的熒光團(tuán)通常是用紫外線激發(fā)濾光片組合使用,許多紫色過濾器集能產(chǎn)生的影像。

從大鼠袋鼠腎上皮細(xì)胞(PTK2線)的培養(yǎng)深藍(lán)色熒光發(fā)射強度是在圖2的(c)。 將培養(yǎng)物免疫熒光標(biāo)記與初級抗細(xì)胞角蛋白(一種中間絲蛋白),隨后偶聯(lián)至碼頭藍(lán)山羊抗-小鼠Fab片段的小鼠單克隆抗體。 *大吸收碼頭藍(lán)的是365納米,并且*大發(fā)射發(fā)生在460納米。 另外,將試樣同時染色線粒體與MitoTracker紅CMXRos。 注意沒有信號從紅色熒光團(tuán)與該帶通發(fā)射濾波器的組合。

自身熒光在植物組織(玉米粒分)在圖2(f)中表示的,并表明內(nèi)源性熒光團(tuán)在這些標(biāo)本的深藍(lán)色發(fā)光光譜。 注意,與BFP濾波器組合表現(xiàn)出少得多的背景熒光比所述長通發(fā)射(Ⅴ-1AV-2A)紫色激發(fā)過濾器集的拍攝圖像。




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