一.Lambert-Beer 定律——光吸收基本定律
“Lambert-Beer 定律” 是說明物質(zhì)對(duì)單色光吸收的強(qiáng)弱與吸光物質(zhì)的濃度（c）和 液層厚度 （b）間的關(guān)系的定律，是光吸收的基本定律，是紫外-可見光度法定量的基礎(chǔ)。
Lambert定律—— 吸收與液層厚度 （b）間的關(guān)系
Beer 定律—— 吸收與物質(zhì)的濃度（c）間的關(guān)系
“ Lambert-Beer 定律 ”可簡述如下：
當(dāng)一束平行的單色光通過含有均勻的吸光物質(zhì)的吸收池（或氣體、固體）時(shí)，光的一部分被溶液吸收，一部分透過溶液，一部分被吸收池表面反射；
設(shè)：入射光強(qiáng)度為I0，吸收光強(qiáng)度為Ia，透過光強(qiáng)度為It，反射光強(qiáng)度為Ir，則它們之間的關(guān)系應(yīng)為：
I0 = Ia + It +Ir (4)
若 吸收池的質(zhì)量和厚度都相同，則 Ir 基本不變，在具體測定操作時(shí) Ir 的影響可互相抵消（與吸光物質(zhì)的 c及b 無關(guān)）
上式可簡化為： I0 = Ia +It (5)
實(shí)驗(yàn)證明：當(dāng)一束強(qiáng)度為 I0 的單色光通過濃度為 c、液層厚度為b 的溶液時(shí)，一部分光被溶液中的吸光物質(zhì)吸收后透過光的強(qiáng)度為 It ，則 它們之間的關(guān)系為：
稱為透光率，用T %表示。
稱為 吸光度，用A 表示
則 A= -lgT =K · b ·c (7)
此即 Lambert-Beer 定律 數(shù)學(xué)表達(dá)式。
L-B 定律 可表述為：當(dāng)一束平行的單色光通過溶液時(shí)，溶液的吸光度 (A) 與溶液的濃度 (C) 和厚度 (b) 的乘積成正比。它是分光光度法定量分析的依據(jù)。
二.吸光度的加和性
設(shè) 某一波長（ l ）的輻射通過幾個(gè)相同厚度的不同溶液c1，c2?? cn，其透射光強(qiáng)度分別為 I1，I2 ?? In，根據(jù)吸光度定義：這一吸光體系的總吸光度為
而 各溶液的吸光度分別為：
(8)
吸光度的和為： (9)
即 幾個(gè)（同厚度）溶液的吸光度等于各分層吸光度之和。
如果溶液中同時(shí)含有 n 中吸光物質(zhì)，只要各組分之間無相互作用（不因共存而改變本身的吸光特性），則：
A =K1C1 b1 +K2C2 b2+ ??KnCnbn= A1 +A2+ ?? +An (10)
應(yīng)用：①進(jìn)行光度分析時(shí)，試劑或溶劑有吸收，則可由所測的總吸光度 A 中扣除，即 以試劑或溶劑為空白的依據(jù)；
②測定多組分混合物；
③校正干擾。
三.吸光系數(shù)
Lambert-Beer 定律中的比例系數(shù)“K ”的物理意義是：吸光物質(zhì)在單位濃度、單位厚度時(shí)的吸光度。
一定條件（T、l 及溶劑）下， K 是物質(zhì)的特征常數(shù)，是定性的依據(jù)。
K 在標(biāo)準(zhǔn)曲線上為斜率，是定量的依據(jù)。常有兩種表示方法：
1. 摩爾吸光系數(shù)（e）：當(dāng) c用mol/L 、b用 cm為單位時(shí)，用摩爾吸光系數(shù) e 表示，單位為 L/mol·cm
A = e · b · c (11)
e 與 b及c 無關(guān)。 e 一般不超過105 數(shù)量級(jí)，通常： e > 104 為強(qiáng)吸收； e< 102 為弱吸收； 102> e > 104 為中強(qiáng)吸收。
吸收系數(shù)不可能直接用 1mol/L 濃度的吸光物質(zhì)測量，一般是由較稀溶液的吸光系數(shù)換算得到。
2. 吸光系數(shù)
當(dāng) c用 g/L ，b 用 cm 為單位時(shí)，K 用吸光系數(shù) a 表示，單位為 L/g·cm
A = a · b · c (12)
e 與 a 之間的關(guān)系為： e = M · a (13)
e ——通常多用于研究分子結(jié)構(gòu)
a——多用于測定含量。
四.引起偏離 Lambert-Beer 定律的因素
根據(jù) L-B 定律，A與c的關(guān)系應(yīng)是一條通過原點(diǎn)的直線，稱為“標(biāo)準(zhǔn)曲線”。但事實(shí)上往往容易發(fā)生偏離直線的現(xiàn)象而引起誤差，尤其是在高濃度時(shí)。導(dǎo)致偏離L-B定律的因素主要有：
1. 吸收定律本身的局限性
事實(shí)上， L-B 定律是一個(gè)有限的定律，只有在稀溶液中才能成立。由于在高濃度時(shí)（通常 C> 0.01mol/L），吸收質(zhì)點(diǎn)之間的平均距離縮小到一定程度，鄰近質(zhì)點(diǎn)彼此的電荷分布都會(huì)相互受到影響，此影響能改變它們對(duì)特定輻射的吸收能力，相互影響程度取決于C，因此，此現(xiàn)象可導(dǎo)致A與C線性關(guān)系發(fā)生偏差。
此外， 
（ n 為折射率）
只有當(dāng) c ￡0.01mol/L（低濃度）時(shí)，n 基本不變，才能用e代替e真 。
2. 化學(xué)因素
溶液中的溶質(zhì)可因 c 的改變而有離解、締合、配位以及與溶劑間的作用等原因而發(fā)生偏離L-B 定律的現(xiàn)象。
例：在水溶液中，Cr(Ⅵ)的兩種離子存在如下平衡
Cr2O42- +H2O ? 2CrO42- +2H+
Cr2O42- 、CrO42- 有不同的 A 值，溶液的 A 值是二種離子的 A 之和。但由于隨著濃度的改變（稀釋）或改變?nèi)芤旱?/span> pH 值， [Cr2O42- ] /[CrO42-] 會(huì)發(fā)生變化，使C總與 A總 的關(guān)系偏離直線。
消除方法：控制條件。
3. 儀器因素（非單色光的影響）
L-B 定律的重要前提是“單色光”，即 只有一種波長的光；實(shí)際上，真正的單色光卻難以得到。由于吸光物質(zhì)對(duì)不同 l 的光的吸收能力不同（ e 不同），就導(dǎo)致對(duì)的偏離。“單色光”僅是一種理想情況，即使用棱鏡或光柵等所得到的“單色光”實(shí)際上是有一定波長范圍的光譜帶，“單色光”的純度與狹逢寬度有關(guān)，狹縫越窄，他所包含的波長范圍也越窄。
4. 其它光學(xué)因素
（1）散射和反射：渾濁溶液由于散射光和反射光而偏離 L-B
（2）非平行光
