dsDNA HS Assay Kit實(shí)驗(yàn)步驟:
使用熒光儀進(jìn)行dsDNA定量檢測(cè)分析
1、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
(1)使用前,將試劑盒中的各組分恢復(fù)至室溫。
?。?)準(zhǔn)備足量的0.5 mL PCR定量管并在管蓋上做好標(biāo)記。推薦使用Mich Assay Tube(Cat. No.M-PCR-0.5-C)。(注意:請(qǐng)勿在PCR管側(cè)壁標(biāo)注,以免影響熒光信號(hào)采集)
2、配制待檢樣品
?。?)配制待檢標(biāo)準(zhǔn)品。取190 μLworking solution至標(biāo)準(zhǔn)品PCR管中,在相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品PCR管中分別加入10 μL dsDNA Standard 1和dsDNA Standard 2,輕輕渦旋振蕩2-3 sec(注意:盡量避免產(chǎn)生氣泡)。
?。?)配制待檢樣品。根據(jù)需要,取180-199 μL檢測(cè)工作液至樣本PCR管中,分別加入1-20 μL待檢樣本,使PCR管中每個(gè)樣本終體積為200 μL,輕輕渦旋振蕩2-3 sec(注意:盡量避免產(chǎn)生氣泡)。
3、檢測(cè)
?。?)將所有待檢PCR管在室溫避光孵育2 min。
?。?)按照熒光儀或者酶標(biāo)儀的操作說(shuō)明,選擇1X dsDNA High Sensitivity檢測(cè)程序測(cè)定熒光信號(hào)值。
三、運(yùn)輸和保存:
有效期:12個(gè)月,2-8℃避光保存。冰袋運(yùn)輸。
四、注意事項(xiàng):
?。?)熒光染料均存在淬滅問題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅;
?。?)關(guān)于DNA標(biāo)準(zhǔn)品,每次使用前請(qǐng)先上下顛倒數(shù)次,瞬時(shí)離心數(shù)秒(請(qǐng)勿渦旋振蕩);
?。?)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。