C18色譜柱是在高純硅膠基質(zhì)上鍵合C18長鏈的色譜柱。粒徑均一,柱壓低,而且*的端基封尾確保分析酸性、堿性化合物時都能得到良好的峰型。色譜柱含碳量較低,能夠加快疏水性化合物出峰,縮短色譜柱平衡化時間,并耐受100%水相流動相,此款色譜柱比較適合從極性到弱極性等寬極性范圍的樣品分析。
基于反相色譜機(jī)制,溶質(zhì)疏水部分與C18鏈相互作用,化合物極性越小,保留越強(qiáng),通常采用水/有機(jī)相(甲醇或乙腈)梯度洗脫。
C18色譜柱的使用注意事項(xiàng):
1、pH范圍:常規(guī)柱pH范圍為2~8,特殊柱可達(dá)1~12,需嚴(yán)格控制流動相pH值,以免損壞柱子。
2、溫度限制:通常小于60℃,避免高溫對色譜柱造成損害。
3、流動相和樣品溶液處理:流動相使用前需進(jìn)行脫氣處理,樣品溶液需經(jīng)適當(dāng)?shù)那疤幚砑斑^濾,以減少柱污染和堵塞。
4、流動相種類更換:注意溶劑的互溶性,防止發(fā)生鹽析現(xiàn)象。
5、操作壓力:柱子的實(shí)際操作壓力應(yīng)低于填裝時的最高壓力,最好在最高壓力一半以下,一般不超過20~29MPa。
6、樣品預(yù)處理:樣品要盡可能清潔,可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理柱(SPE)對樣品進(jìn)行預(yù)處理;若樣品不便處理,要使用保護(hù)柱。