當(dāng)前市場(chǎng)上的病毒保存液幾乎都是直接保存活病毒，導(dǎo)致采樣、運(yùn)輸和檢測(cè)中的醫(yī)護(hù)人員均面臨較高的感染風(fēng)險(xiǎn)，針對(duì)這種情況，抗疫一線非常需要能直接滅活病毒的樣本保存液。
但應(yīng)該注意的是：在滅活病毒的同時(shí)，還應(yīng)考慮保存液能否穩(wěn)定保存病毒核酸的完整性，避免樣本中的核酸在檢測(cè)前降解，造成核酸檢測(cè)“假陰性"。
中科檢測(cè)作為專業(yè)的第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)，開展病毒保存液檢測(cè)，病毒保存液病毒滅活測(cè)試，報(bào)告內(nèi)容主要包含試驗(yàn)毒株、實(shí)驗(yàn)批次、保存溫度、保存天數(shù)、病毒滴度、病毒活性及病毒滅活率等檢測(cè)數(shù)據(jù)。
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病毒保存液檢測(cè)對(duì)象及步驟
1. 病毒保存液檢測(cè)對(duì)象
毒株：甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
細(xì)胞：MDCK細(xì)胞
2.病毒保存液檢測(cè)步驟
1）取樣品病毒保存液（非滅活型） 9.8mL，加入0.2mL病毒原液混勻，分裝若干測(cè)試液，存至要求溫度；
2）保存至對(duì)應(yīng)天數(shù)后取出測(cè)試液，檢測(cè)病毒滴度；
a）10倍倍比稀釋測(cè)試液；
b）將稀釋液加入含生長(zhǎng)至單層的MDCK細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，并設(shè)置正常對(duì)照組，加等量培養(yǎng)液；
c）置于35'C、5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育60 min后棄去上清液，加入雙抗400 IU/mL的維持培養(yǎng)液繼續(xù)孵育3~5天，每天觀察細(xì)胞增長(zhǎng)狀況；
d）當(dāng)接種病毒的MDCK細(xì)胞出現(xiàn)變圓或縮小等病變現(xiàn)象時(shí)，記錄產(chǎn)生細(xì)胞病變的情況；
e）根據(jù)Reed-Muench公式計(jì)算半數(shù)感染量TCID50。
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