Thermo ND 2000微量分光光度計(jì)
NanoDrop 2000超微量紫外//可見分光光度計(jì)是NanoDrop的新產(chǎn)品，應(yīng)用液體的表面張力特性，樣品體積只需要0.5~2ul，在檢測(cè)臺(tái)上，經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達(dá)到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細(xì)管等耗材檢測(cè)吸收值的優(yōu)點(diǎn)。此產(chǎn)品設(shè)計(jì)受保護(hù)，并在廣受歡迎，其準(zhǔn)確度與便利性讓科學(xué)家得以更有效率進(jìn)行各項(xiàng)研究。
NanoDrop 2000使用高能量氙燈（pulsed xenon flash lamp）可提供190~840nm的全光譜檢測(cè)，且不需要暖機(jī)，開機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array檢測(cè)器，檢測(cè)吸收值可高達(dá)300Abs（dsDNA濃度2~15000ng/ul），大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測(cè)。
待測(cè)樣品的均質(zhì)性是NanoDrop 2000的高要求，一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測(cè)前以vortex mixer震勻?yàn)樘摵?，若無(wú)vortex mixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔(dān)心genomic DNA可能因前述動(dòng)作而斷裂，則改以55?C加熱約一分鐘，使樣品在偵測(cè)前呈現(xiàn)均勻狀態(tài)，以確保2ul具有代表性。
檢測(cè)時(shí)選擇不同檢測(cè)模式，可以得到快速的結(jié)果：
Nucleic Acid –吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
UV-Vis – 190~840nm間所有波長(zhǎng)的吸收值及光譜（以1mm光徑吸收值呈現(xiàn)）。
A280蛋白質(zhì)定量法– 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì)，須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)（mass extinction coefficient）方可計(jì)算。
BCA、Bradford及Lowry –依不同呈色劑提供不同波長(zhǎng)吸收值結(jié)果，自動(dòng)畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算R square，待測(cè)蛋白質(zhì)濃度。
蛋白質(zhì)檢測(cè)模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑，因呈色劑隨時(shí)間會(huì)逐漸加深，使用前請(qǐng)?jiān)旈喸噭┱f(shuō)明書并制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，在快時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè)，以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線多可有七個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品多可做五重復(fù)。
測(cè)蛋白質(zhì)時(shí)樣品體積需使用2ul，每個(gè)樣品檢測(cè)后需以Kimwipes低塵擦拭紙（編號(hào)：34155）擦拭15~20回，以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。
Thermo ND 2000微量分光光度計(jì)濃度范圍：
樣品種類 | 低濃度 | 高濃度 （超過(guò)時(shí)請(qǐng)稀釋樣品） | 再現(xiàn)性（五重復(fù)以上） |
核酸 | 2 ng/ul | 15000 ng/ul （dsDNA） 12000 ng/ul （RNA） | 濃度范圍在 2-100 ng/ul 時(shí)，SD為 ± 2 ng/ul 濃度范圍大于 100 ng/ul 時(shí)，CV為 ± 2% |
純BSA | 0.10 mg/ml | 100 mg/ml | 濃度范圍在0.05-10 mg/ml時(shí)，SD為± 0.10 mg/ml 濃度大于10 mg/ml時(shí)，CV為± 2% |
蛋白質(zhì)，以BCA方式定量 | 0.2 mg/ml | 8.0 mg/ml | CV：± 2% （在可偵測(cè)的濃度范圍內(nèi)皆然） |
蛋白質(zhì)，以modified Lowry方式定量 | 0.2 mg/ml | 4.0 mg/ml | CV：± 2%（在可偵測(cè)的濃度范圍內(nèi)皆然） |
蛋白質(zhì)，以Bradford方式定量 | 100 ug/ml | 8000 ug/ml | 濃度范圍在 100-500 ug/ml 時(shí)，SD為 ± 25 ug/ml 濃度大于 500 ug/ml 時(shí)，CV為 ± 5% |
蛋白質(zhì)，以Mini Bradford方式定量 | 15 ug/ml | 100 ug/ml | 濃度范圍在15-50 ug/ml時(shí)，SD為± 4 ug/ml 濃度大于50 ug/ml時(shí)，CV為± 5% |
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